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concept
二、Hi-C技术原理
Hi-C实验流程: 1. **甲醛交联**:将空间上接近的DNA片段共价交联 2. **酶切**:用限制性内切酶(如HindIII、DpnII)切割DNA 3. **末端修复和生物素标记**:补平粘性末端并掺入生物素标记的dNTP 4. **连接**:稀释后连接,使空间上接近的片段连接在一起 5. **去交联和测序**:打断DNA,富集生物素标记的嵌合片段,进行双端测序 Hi-C数据分析用于基因组...
📖 定义
Hi-C实验流程:
1. 甲醛交联:将空间上接近的DNA片段共价交联
2. 酶切:用限制性内切酶(如HindIII、DpnII)切割DNA
3. 末端修复和生物素标记:补平粘性末端并掺入生物素标记的dNTP
4. 连接:稀释后连接,使空间上接近的片段连接在一起
5. 去交联和测序:打断DNA,富集生物素标记的嵌合片段,进行双端测序
Hi-C数据分析用于基因组组装:
- 构建接触矩阵(contact matrix):染色体各区域之间的相互作用频率
- 同一染色体上的区域相互作用频率高(呈现对角线富集)
- 相邻区域相互作用频率高于远端区域
- 使用算法(如3D-DNA、SALSA、ALLHiC)将contig聚类到染色体组、确定顺序和方向